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當前位置:首頁新聞中心gⅥ-cDNA噬菌粒文庫小規(guī)模的獲取和純化

gⅥ-cDNA噬菌粒文庫小規(guī)模的獲取和純化

更新時間:2013-01-04點擊次數(shù):1032

[方法]
1.將克隆體接種到100ul LBAT 96孔培養(yǎng)板上,并在37℃過夜振蕩培養(yǎng)(180r/min)。
2.使用96孔復制板將其接種到裝有200ul LBAT的第二塊96孔培養(yǎng)板上,在37℃培養(yǎng)直到生長中期(大約1,5小時)。
3.在每一孔中加入10ul 2×1011TU/mlR408輔助噬菌體。
4.37℃無振蕩培養(yǎng)30分鐘。
5.37℃過夜振蕩培養(yǎng)。
6.4℃800g離心20分鐘,收集細胞。
7.將上清液轉移到一新的96孔培養(yǎng)板上,并加40pul PEG/NaCl。
8.將板放置于冰上1小時。
9.4℃800g離心20分鐘,收集噬菌體顆粒,小心除去上清液,在50ulPBS溶液中打散顆粒。

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