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當(dāng)前位置:首頁(yè)新聞中心gⅥ-cDNA融合噬菌體ELISA

gⅥ-cDNA融合噬菌體ELISA

更新時(shí)間:2013-01-04點(diǎn)擊次數(shù):1003

[方法]
1.用200ul PBST沖洗鏈霉素包被的微量濃度測(cè)定板的每個(gè)孔3次。
2.在2mol/LPBS中稀釋生物素配體(BAS噬菌體—ELISA)或生物素捕獲抗體(ISA噬菌體—ELISA),直到終濃度為10—50nmol/l,再加100ul這種溶液到農(nóng)度測(cè)定板中的每個(gè)孔中。
3.在室溫下孵育濃度測(cè)定板1小時(shí)。
4。用200ul PBST沖洗每個(gè)孔5次。
5.在2mol/LPBS中稀釋噬菌體溶液到濃度為1×1011TU/ml,在*次用來(lái)稀釋IAS融合噬菌體的2mol/LPBS中加入誘餌血清或預(yù)免疫血清,再將100ul這種懸浮液轉(zhuǎn)移到每個(gè)孔中。
6.在室溫下孵育濃度測(cè)定板2小時(shí)。
7,用200ul PBST沖洗每個(gè)孔5次。
8。加100ul HRP/抗M13連接物(PBS2M稀釋為1:5000)。
9。室溫下孵育濃度測(cè)定板l小時(shí)。
10.用200ul PBST沖洗每個(gè)孔5次。
11.向每個(gè)孔中加100ul TMB底物溶液。
12.室溫下孵育濃度測(cè)定板15~30分鐘(或直到顏色發(fā)生變化)。
13.用100ul 2 mol/L H2SO4停止反應(yīng)。
14.在450nm讀吸收值。

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